CC

۱۵۷،۳۳

۱۱٫۳– الکتروفورز
به منظور مشاهده قطعات DNAحاصل ازRFLP^[16]، جهت تعیین چندشکلی ژنتیکی CAT C-262TوNQO1 C609T، آن­ها را به ژل ۵/۱ % آگاروز منتقل می­کنیم. برای تهیه ژل ۵/۱ %، ۷۲/۱ گرم پودر آگاروز را با ۱۱۵ سی سی TBE 0.5x مخلوط کرده و با قرار دادن شانه درون ژل چاهک درست می­کنیم. پس از سرد شدن ژل و خارج کردن شانه مواد حاصل از هضم آنزیمی را با x Loading 6 مخلوط و به چاهک ها منتقل می­کنیم در یکی از چاهک­ها bp DNA Ladder100 به عنوان نشانگر طول قطعات می­ریزیم و با برقراری جریان الکتریکی قطعات DNA حاصل براساس اندازه خود در طول ژل از قطب منفی به مثبت دستگاه الکتروفورز حرکت کرده و از هم جدا می­شوند.

۱۲٫۳–رنگ آمیزی ژل
به منظور اینکه قطعات DNA روی ژل آگاروز قابل رؤیت شود، ژل را از دستگاه الکتروفورز بیرون آورده و به مدت ۱۰الی ۱۵ دقیقه درون ظرف حاوی اتیدیوم بروماید (µg/ml1) قرار می­دهیم، پس از آن ژل را درون دستگاه Gel documentation قرار داده و با روشن کردن نور UV از آن عکس گرفته و مشاهده می­کنیم.
شکل ۱٫۳- نتایج حاصل از PCR -RFLPچند شکلی ژنتیکی CAT C-262T
قابل مشاهده بر روی ژل آگاروز
شکل ۲٫۳- نتایج حاصل از PCR -RFLP چند شکلی ژنتیکی C609TNQO1
قابل مشاهده بر روی ژل آگاروز
۱۳٫۳– تحلیل آماری
نتایج حاصل از مطالعه که برروی بیماران پیوند کلیه و چند­شکلی ژن­های CAT وNQO1 انجام گرفت بانرم­افزار SPSS، با به کارگیری روش کای اسکور (x²) و آنالیز آماری رگرسیون لوجستیک و آزمون t-test با در نظر گرفتن سطح معنی­داری ٠۵/٠P< مورد تجزیه و تحلیل قرار دادیم.
فصل چهارم
نتایج
۱٫۴–مشخصات افراد شرکت کننده در این مطالعه
در این مطالعه ۲۲۲ نفر از بیماران پیوند کلیه با میانگین سنی ۵۴/۱۴±۶۸/۴۱ مورد بررسی قرار گرفتند. در میان بیماران پیوند کلیه ۴۱ بیمار با میانگین سنی ۴۷/۱۴±۹۳/۴۳ با رد حاد پیوند کلیه و ۱۸۱ بیمار با میانگین سنی ۵۶/۱۴±۱۷/۴۱ بدون رد حاد پیوند بوده ­اند. همچنین ۲۲۴ نفر افراد سالم با میانگین سنی ۱۴/۱۵ ±۴۹/۴۰ به عنوان گروه کنترل مورد استفاده قرار گرفت.
۲٫۴–نتایج حاصل از بررسی ریسک فاکتور های دخیل در رد پیوند کلیه و مشخصات بیماران
آنالیز عوامل خطر مانند جنسیت پذیرنده و دهنده بافت، گروه خونی، سن گیرنده ودهنده بافت بین گروه ­های
بیمار دارای رد حاد و فاقد رد حاد پیوند تفاوت معنی داری از لحاظ آماری نشان نداد. )۰۵/۰<P)
آنالیز عوامل خطر از طریق تست رگرسیون لوجستیک انجام گرفت. در بررسی عامل RH همانطور که در جدول
زیر مشاهده می­ شود به دلیل اینکه تعداد افراد با RH منفی در گروه بیمار دارای رد حاد برابر صفر بود نتوانستیم
از این روش آماری استفاده کنیم که بجای آن از Pearson chi-squer استفاده شد و نتیجه برابر با ۲۵۱/۰
بدست آمد. در مورد منبع بافت دریافتی نیز به دلیل کم بودن تعداد بیمارانی که از افراد زنده بافت دریافت
کرده بودند (۸=N) نتوانستیم آنالیز بر روی آن ها انجام دهیم ولی بیمارانی که از جسد بافت دریافت کرده
بودند را بطور جداگانه مورد بررسی قراردادیم که در ادامه آمده است.
جدول ۱٫۴- بررسی ریسک فاکتورهای دخیل در رد پیوند کلیه و مشخصات بیماران

فاکتور مورد مطالعه

فاقد رد پیوند حاد
(n=181)(%)

دارای رد پیوند حاد
(n=41)(%)

OR

CI%95

P-value

جنسیت گیرنده